Ubicación de la secuencia repetitiva PFCOL692 en fragmentos genómicos de Plasmodium falciparum / Location of the repetitive sequence PFCOL692 in genomic fragmens of Plasmodium faciparum

Las secuencias repetitivas son componentes estructurales de los genomas eucariotes. Se desconoce la función de la mayoría de ellas, pero, al parecer, no son simplemente ADN egoísta sino que intervienen en procesos de recombinación y regulación génica. En este estudio se estableció la localización subtelomérica de la secuencia repetitiva PFCOL692 en los cromosomas de Plasmodium falciparum, a través de la caracterización de cuatro clones de la genoteca lambda EMBL4/PFCOL692, que contenían insertos entre 15 y 23Kb de ADN genómico del parásito; esta caracterización se hizo mediante análisis de restricción y la posible ubicación de PFCOL692 en el genoma se exploró utilizando sondas específicas para las regiones teloméricas (pTB4.1) y subtelomérica (pRep20) de los cromosomas de P. falciparum. El análisis de los mapas de restricción obtenidos permitió plantear una posible ubicación de PFCOL692 en el extremo de los cromosomas del parásito, donde las copias de esta secuencia se encuentran agrupadas en un segmento del subtelómero y con una posición conservada con respecto a la secuencia pRep20. Se sugiere, además, que PFCOL692 no se encuentra en el límite entre el subtelómero y el telómero

Evaluación de dos métodos para la separación de RNA mensajero de Plasmodium falciparum / Evaluation of two methods for the separation of Plasmodium falciparum messenger RNA

En muchos casos, el estudio de la regulación de la expresión de genes específicos, requiere el aislamiento de su RNA mensajero (mRNA) a partir del RNA total presente en la célula. Con el fin de garantizar la prescencia de secuencias que se expresan en baja abundancia, es indispensable obtener preparaciones de mRNA que sean representativas de la población de mensajeros del organismo de en estudio. En este trabajo se evaluó el rendimiento del mRNA de Plasmodium faciparum obtenido por dos métodos: cromatografía de afinidad en columnas de oligo dT celulosa y captura del mRNA por hibridización en solución con un primer oligo dT. Con los dos métodos, se obtuvieron rendimientos similares en un rango entre 07, y 1,1 por ciento con respecto al RNA total de cromatografía fue de 0,4 a 4 Kb, mientras que los provenientes del método de captura, permitieron un rango entre 0,4 y 8 Kb. Este hecho sugiere las mejores posibilidades que ofrece el método de captura para obtener poblaciones de mensajeros con mayores tamaños, si se compara con el método tradicional. La presencia de clones con genes de copia única como son los de tubulina, actina II, miosina, calmodulina, glucosa fosfato-isomerasa y glucosa-fosfato-deshidrogenasa, en genotecas de cDNA, permiten inferir una buena representatividad de las secuencias expresadas en la preparación de mRNA